结核病防控技术
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  一﹑概述

  (一)病原

  结核病的病原是分枝杆菌属(Mycobacterium)的3个种,即结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)和禽分枝杆菌(M.avium)。结核分枝杆菌是直或微弯的细长杆菌,呈单独或平行相聚排列,多为棍棒状,间有分枝状。牛分枝杆菌稍短粗,且着色不均匀。禽分枝杆菌短而小,为多形性。本菌不产生芽孢和荚膜,也不能运动,为革兰阳性菌,常用的染色方法为Ziehl-Neelsen抗酸染色法。

  结核分枝杆菌细胞壁中含有丰富的蜡脂类,其在自然环境中生存力较强,对干燥和湿冷的抵抗力很强,在干燥的痰中可存活10个月,粪便、土壤中7个月,常水中5个月。但对热的抵抗力差,60℃30分钟即可死亡。在直射阳光下经数小时死亡。常用消毒药经4小时可将其杀死,70%酒精、10%漂白粉、氯胺、石炭酸、3%甲醛等均有可靠的消毒作用。本菌对链霉素、异烟肼、对氨基水杨酸和环丝氨酸等敏感,对磺胺类、青霉素和其他广谱抗生素均不敏感。

  (二)疫病特点

  结核杆菌侵入机体后,与吞噬细胞相遇,易被吞噬或将结核菌带入局部的淋巴管和组织,并在侵入的组织或淋巴结处发生原发性病灶,细菌被滞留并在该处形成结核。如果机体抵抗力强,此局部的原发性病灶局限化,长期甚至终生不扩散。如果机体抵抗力弱,疾病进一步发展,细菌经淋巴管向其他一些淋巴结扩散,形成继发性病灶。当疾病继续发展,细菌则进入血流,散布全身,引起其他组织器官的结核病灶或全身性结核。

  结核病分为初次感染和二次感染。二次感染多发生于成年动物,可以是外源性的,也可以是内源性的。二次感染的特点是由于特异性免疫作用而使病变只局限于某个器官。

  机体对结核分枝杆菌的免疫机理首先是细胞免疫,其次是体液免疫,二者是分离的。细胞免疫随机体抵抗力增强而增强,体液免疫随机体抵抗力减弱而增强。所以,牛体受结核杆菌的感染后首先产生有效的细胞免疫,并能长期将感染限制在局部区域使之不能扩散,因体液免疫反应出现较迟且往往反应低下,因而导致血清学检测方法的灵敏度和特异性较低。高水平的循环抗体可见于病情恶化之后,可能与细胞免疫失败而失去对分枝杆菌繁殖的限制有关。

  (三)流行与危害

  本病除可感染人外,还能感染50多种哺乳动物和20多种禽类。家畜中以牛,尤为奶牛最敏感。患病动物尤其是开放性结核的动物是传染源,牛结核主要通过呼吸道、消化道传播。患结核病的牛咳嗽时,可将带菌飞沫排于空气中,人和牛及其他动物吸人即可感染。犊牛通过吮乳经消化道感染为多。散养牛患结核病率为1%〜5%,而圈养奶牛因畜舍通风差互相密切接触,其传播速度将更迅速。另外,病畜、病禽的排泄物也可带菌,这些排泄物若不经处理,可能再度污染水源、流入田地,从而感染人和其他动物。

  本病无季节流行性,一年四季均可发生。在农村主要以散发为主,规模化养殖场以区域性流行为主。

  检疫不严格,盲目引种,对检出阳性牛不及时处理,未能从根本上消灭传染源以及人畜间相互感染等是造成牛结核病不断发生和流行的主要原因。近年来,抗生素的大量应用,导致许多耐药性结核菌株的出现和传播,给结核病的治疗带来了很大困难。

  人类感染肺结核会严重影响身体健康,若不彻底治疗会丧失劳动能力,甚至造成死亡。除此之外,肺结核通过呼吸道传播,传染性强,危及他人的身体健康。肺结核疫情若不加以控制,还将对国民经济造成重大影响。耐多药肺结核对个人和家庭和社会的危害则更大。与普通肺结核相比,耐多药肺结核因诊断、治疗所需时间长而导致其传染期更长,患者迁延不愈,四处流动,则大大增加了耐多药菌传播的机会和范围,而被感染者一旦发病即直接成为耐多药肺结核患者。此外耐多药肺结核治疗费用昂贵,将对家庭和社会带来沉重的经济负担。

  牛结核较高的流行率和过高的扑杀成本导致一些国家的政府难以承受相应的巨大经济负担,过低的政府补偿也导致养殖者难以承受扑杀带来的经济损失。此外,牛结核的存在也严重威胁着人类的健康。控制家畜的牛结核病,就能够降低人类暴露在牛分枝杆菌环境的概率,从而降低人类感染牛结核病的风险。

  二﹑症状与诊断

  (一)症状

  结核病潜伏期一般为3~6周,有的可长达数月或数年。临床上通常呈慢性经过,病初症状不明显,病程长时出现渐进性消瘦、营养不良、体表淋巴结肿大等症状。其他症状依赖于发病部位,表现出发病器官受损的相应临床症状。

  患病奶牛的寿命缩短,役牛劳动能力下降。无论哪种类型的结核病,淋巴结都是首先受侵染的组织,尤其是头部和胸部淋巴结。其他组织的结核病最常见的是肺结核病,其次为乳房结核病、肠结核病,较为少见的有生殖器官结核病和脑结核病。

  肺结核病最常见,绝大部分牛结核病为肺结核病。发病初期可能出现短促的干咳,干咳逐渐加重,变为湿咳;呼吸增数,鼻孔时有淡黄色黏液或脓性鼻液流出。听诊肺部有啰音或摩擦音,叩诊为浊音。一旦出现体温变化或指压气管导致咳嗽、呼吸困难或出现轻度肺炎症状等则可初步确定为肺部受到侵染。在进行性病例中,淋巴结多表现为肿大,从而导致空气流通受阻,食道或血管堵塞;头、颈部淋巴结有时可见明显的破溃和淋巴液外渗。病牛日渐消瘦、贫血,哺乳期的母牛产奶量减少。部分病牛在感染晚期会出现极度消瘦和急性呼吸窘迫。

  患乳腺结核病的病牛初期会出现乳腺肿胀,之后在病牛的乳腺位置出现许多结节,病牛的乳汁将逐步出现混浊的凝乳块和絮状物。发病严重时乳腺将停止泌乳。肠结核病多见于犊牛,表现为消化不良,顽固性腹泻,迅速消瘦。病牛的粪便有腥臭味,大多混有脓汁或血液。

  (二)诊断

  在畜(禽)群中有发生进行性消瘦、咳嗽、慢性乳房炎、顶固性下痢、体表淋巴结慢性肿胀等症状,可作为本病初步诊断的依据。但通常须结合流行病学、临诊症状、病理变化、结核菌素试验,以及细菌学试验和血清学试验等综合诊断较为切实可靠。

  1.细菌学诊断

  本法对开放性结核病的诊断具有实际意义。采取病畜的病灶、痰、尿、粪及其他分泌物,做抹片检查(直接涂片镜检或集菌处理后涂片镜检,可用抗酸性染色法),分离培养和动物接种试验。采用免疫荧光抗体技术检查病料,具有快速、准确、检出率高等优点。

  2.结核菌素试验

  结核菌素试验是检测牛结核的标准方法,也是国际贸易指定试验。该法通过皮内注射牛结核菌素纯化蛋白行生物(PPD),于72小时后测量注射部位的肿胀(迟发性过敏)程度。接种时可单独采用牛结核菌素,也可采用禽型和牛型结核菌素进行比较试验。接种部位通常为颈中部皮内,也可在尾褶皮内;但以颈中接种较敏感,而尾褶接种通常需较大剂量的结核菌素才能达到同样的敏感性。为使结果可靠,皮试区域应剪毛,注射部位应准确,注射前后用卡尺测量皮肤厚度。

  3.血液检测试验

  除传统的结核菌素皮试外,也可采用血液检测方法;但因血液检测操作复杂,费用昂贵,通常只作为辅助试验(平行试验),以最大限度检出感染动物;或作为确诊试验(系列试验),用于验证皮试结果。经过皮试的感染动物,在随后的几周内可提高血液检测效果;有利于独立进行体外血液检测反应,提高试验准确性。γ干扰素试验可检测细胞免疫性,而酶联免疫吸附试验(ELISA)可检测体液免疫性。

  γ干扰素试验作为血液诊断试验,越来越多地用于检测牛以及山羊、水牛等其他结核病动物,可检测出早期感染动物。ELISA似乎更适合检测抗体,可作为补充但不能取代细胞免疫试验,其优点是简便,但敏感性有限,主要原因是感染牛体液免疫出现晚且不规则。

  4.聚合酶链反应(PCR)

  该法已广泛用于病人痰液等临床病料结核分枝杆菌复合群(MTC)的检测,最近也用于动物结核病的诊断;用于牛分枝杆菌检测时,应以细菌培养作为平行试验进行确诊。PCR扩 增产物以杂交探针或凝胶电泳方法分析。

  三﹑防控措施

  (一)疫情报告

  任何单位和个人发现患有本病或者疑似本病的动物,都应当及时向当地动物防疫监督机构报告。动物防疫监督机构接到疫情报告后,立即按《动物疫情报告管理办法》及有关规定及时上报。

  (二)疫情处理

  1.疑似疫情处理

  发现疑似结核病病畜后,畜主应立即将其隔离,并限制其移动。当地动物防疫监督机构要及时派员到现场进行流行病学调查、临床症状检查、病理解剖、病料采集、实验室诊断等工作,根据诊断结果采取相应措施。

  2.确诊疫情处理

  (1)划定疫点、疫区、受威胁区。

  (2)隔离、封锁。零星散发时,可采用圈养和固定草场放牧方式,对病畜及其同群畜实施隔离。隔离所用草场,应远离交通要道、居民点或人畜密集的地区,场地周围最好有自然屏障或人工栅栏。

  当一个自然村、饲养场结核病阳性率在3%以上或病牛10头以上时,应对疫区实施封锁,禁止病牛和疑似病牛、易感动物及其产品调出;对易感动物实行圈养或指定地点饲养,役用动物限制在疫区内使役。

  (3)扑杀及无害化处理扑杀病牛和阳性牛。病死和扑杀的病畜,要按照GB16548-2006 《病害动物和病害动物产品生物安全处理规程》进行无害化处理。

  3.紧急监测

  用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验对疫区和受威胁区的全部牛进行紧急监测。

  4.消毒

  对病畜和阳性畜污染的场所、用具、物品进行严格消毒。

  5.封锁的解除

  封锁的疫区内最后一头病畜及阳性畜被扑杀,经无害化处理后,对疫区内监测45天以上,没有发现新病例;对所污染场所、设施设备和受污染的其他物品进行彻底消毒时,经当地动物防疫监督机构检验合格后,由原发布封锁令的机关解除封锁。

  四﹑预防与控制

  与一般传染病或人的结核病免疫预防不同,我国目前对结核病采取的主要防疫措施是以检疫和淘汰阳性动物为主,同时辅以生物安全措施。

  健康牛群平时加强防疫、检疫和消毒措施。每年春秋两季定期进行结核病检疫,主要用结核菌素,结合临诊等检查。结核菌素反应阳性牛群,应定期与经常地进行临诊检查,必要时进行细菌学检查,发现开放性病牛立即淘汰。病牛所产犊牛出生后只吃3〜5日初乳,以后则由检疫无病的母牛供养或喂消毒乳。犊牛应在出生后1月龄、3〜4月龄、6月龄进行3次检疫,凡呈阳性者必须淘汰处理。如果3次检疫都呈阴性反应,且无任何可疑临诊症状,可放入假定健康牛群中培育。

  假定健康牛群为向健康牛群过渡的畜群,应在第一年每隔3 个月进行1次检疫,直到没有一头阳性牛出现为止。然后在一年至一年半的时间内连续进行3次检疫。如果3次均为阴性反应即可称为健康牛群。

  加强消毒工作,每年进行2〜4次预防性消毒,每当畜群出现阳性病牛后,都要进行1次大消毒。常用消毒药为5%来苏儿,10%漂白粉,3%福尔马林或3%氢氧化钠溶液。

  五﹑人员防护

  食用带菌的乳汁或乳制品是人感染牛分枝杆菌的主要途径,所以饮用消毒乳制品是预防人结核病的重要措施。同时,还应对牛群进行定期检疫,及时淘汰和屠宰病牛。防制人结核病的主要措施是早期发现、严格隔离、彻底治疗。牛乳应煮沸后饮用;婴儿普遍注射卡介苗;与病人、病畜禽接触时应注意个人防护。治疗人结核病有多种有效药物,以异烟肼、链霉素和对氨基水杨酸钠等最为常用。在一般情况下,联合用药可延缓产生耐药性,增强疗效。

  牛场工作人员的工作服、用具要保持清洁,不得带出牛场。在牛场工作时佩戴好口罩、手套等防护用品,工作结束后做好自身的清洁、消毒工作。每年要定期进行健康检查,发现有患结核病的应及时调离岗位,隔离治疗。

  处理结核病病畜时要穿戴好合格的口罩、手套、防护鞋和防护服;处理时,稳定固定病畜,使用注射用针头及采样用刀片等尖锐物品时要注意不要刺伤或割伤自己;处理结束后,收集处理样品和器材,无害化处理病畜尸体,现场进行消毒,最后处理人员进行自我消毒。

  中国动物卫生与流行病学中心 亓 菲 范伟兴

责任编辑:霍然
    
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